【产品简介】
新城疫（Newcastle disease,ND）又名为鸡瘟，是目前危害我过养殖业的主要禽流感业的主要禽流感传染病之一，主要侵害鸡，火鸡，其他禽类和野鸡类，引起呼气道感染及免疫抑制，多年来一直在各类禽类群中广泛存在，虽然有疫苗进行免疫接种，但免疫鸡群仍然发病，给养禽业造成了巨大损失。
【使用意义】
①本产品用于鸡血清抗体的检测，以确定被检鸡是否感染过鸡新城疫病毒或免疫鸡体内抗体水平。
②评估鸡群感染ND的风险程度。
③了解雏鸡母源抗体水平，为ND免疫程序的制定提供参考。
【检测原理】
本品系由包被新城疫病毒的微孔板和酶标记抗鸡IgG及其他试剂组成，应用酶免间接法原理（ELISA）检测鸡血清或血浆中新城疫病毒IgG抗体。
【试剂盒组成】
| 1. | 鸡传染性支气管炎病毒抗原包被微孔板条 | 96T×1 |
| 2. | 酶标记物 | 11ml×1 |
| 3. | 样品稀释液 | 20ml×1 |
| 4. | 显色剂A | 7 ml×1 |
| 5. | 显色剂B | 7 ml×1 |
| 6. | 洗涤液（用前1：25稀释） | 10 ml×2 |
| 7. | 抗体阳性对照血清 | 0.6 ml×1 |
| 8. | 抗体阴性对照血清 | 0.6 ml×1 |
| 9. | 终止液 | 7 ml×1 |
| 10. | 封板膜 | 3 |
| 11. | 密封袋 | 1个 |
| 12. | 说明书 | 1份 |
【使用方法】
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条，设空白、阴性及阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl；空白对照孔不加；样品稀释，血清每孔样本先1：50稀释后加100μl；蛋黄以1:100稀释后每孔加100ul。
4. 混匀，置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤，同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
10. 每孔加终止液50μl，混匀，置酶标仪450nm处测各孔A值（建议用双波长450nm、630nm）。
【结果判定】
1. 阴性对照：正常情况下，阴性对照孔A值≤0.1；
2. 阳性对照：正常情况下，阳性对照孔A值≥0.4；
3. 结果判定：
3.1 未曾免疫
临界值（C.O.）的计算：临界值=0.15+阴性对照孔均值；检测标本A450值≥临界值判定为本试验阳性；检测标本A450值＜临界值判定为阴性。所有阴性、阳性对照和样品的A值均须减去空白平均值后作为计算值；阴性对照孔A值大于0.10时应舍弃，如所有阴性对照孔A值都大于0.10时须重复实验；阴性对照孔低于0.05时以0.05计算。
3.2 免疫鸡群
检测样本A450值≥0.45即血凝滴度≥6log2时有很好的保护；
0.45> A450≥0.2时相应血凝滴度为5log2；
0.3> A450≥0.2时相应血凝滴度为4log2，有一定保护力；
当A450≤0.3时，建议加强免疫。
【注意事项】
1. 操作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
2. 试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
3. 样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
4. 洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
5. 所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
6. 微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽后方可，未用完的微孔板须放入有干燥剂的密封袋中保存。
7. 用于检测的样品应保持新鲜。
8. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
9. 不同批号试剂组分不得混用。
【保存与有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。
